DNA:N ERISTÄMINEN KIIVI-HEDELMÄSTÄ

Toimi näin:


Työn onnistumista edesauttaa, jos kaikki liuokset ovat mahdollisimman kylmiä (säilytä siis "saalis" mahdollisuuksien mukaan jäähauteessa). Pyri myös sekoittamaan ainekset ja aloittamaan suodatus mahdollisimman nopeasti murskaamisen jälkeen, jottei DNA:ta pilkkova entsyymi (DNA-aasi)alkaisi hajottaa sitä

Tarvikkeet/työyksikkö (2-3 hlöä)

  • laborointihansikkaat vain, jollet pysty syömään kiiviä ja/tai sen mehu kutittaa
  • puolikas kiivi
  • ruokasuolaa NaCl
  • astianpesuainetta
  • lusikka, haarukka tmvs. "kaapimistyökalu"
  • huhmare hedelmönlihan jauhamista varten
  • kaksi pienehköä dekantterilasia
  • suodatinsuppilo
  • suodatinpaperi
  • astia, jossa lunta/jäämurskaa/kylmäkalle tmvs., joka pitää suodoksen kylmänä
  • pieni mittalasi tai esim. kertakäyttöpipetti astianpesuainetta varten
  • lasisauva ja/tai hammastikkuja
1. Kaavi halkaistusta puolikkaasta kiivistä pehmeät osat huhmareeseen parissa erässä (vältä kuorta). Hienonna 1-2 erässä huhmareen koosta riippuen. 

2. Sekoita liuos, jossa lisäät 50 ml vettä 5 ml astianpesuainetta sekä vajaa 1 tl suolaa
3. Yhdistä 1 ja 2 samaan dekantterilasiin.
4. Sekoita varovasti ja inkuboi (anna tekeytyä) minuutti.
6. Suodata suppilossa seos puhtaaseen dekantterilasiin, joka on jäähauteessa. Nesteen suodattaminen riittää, liika hedelmänliha saa vain suodatinsuppilon tukkeutumaan. Kärsivällisyyttä! Älä riko suodatinppussia
7. Saatuasi n. 20 ml suodosta mittaa saman verran etanolia (desinfiointiaine, Sinol tmvs.)
8. Valuta jääkylmä etanoli hitaasti dekantterilasin reunoja pitkin. Odota minuutin verran.
9. Sekoita sitten hyvin varovasti lasisauvalla liuoksen pintaa. Malttia!
10. Harmaa helmimäinen utu on DNA:ta. Joskus tämä limamainen rihma ("sylkeä" tai "kiisseliä" muistuttava) seuraavan lasisauvaa ja voit yrittää saada sitä nostettua tai pyöritettyä sauvan ympärille: onneksi olkoon: olet saanut saaliiksi kiivin DNA:ta!

11. Pohdi/selvitä, mikä merkitys DNA:n eristämisessä oli

a) astianpesuaineella
b) suolalla
c) etanolilla

12. MUISTA VALOKUVATA alkumössön, suodatuksen ja lopputuloksen työselostustasi varten!
  • Saman työn voit muuten tehdä vaikkapa kotona omista poskisoluista purskuttelemalla suola-vesiseosta. Astianpesuaine kannattaa lisätä vasta astiaan, mutta muuten periaate on sama :)

Peda.net käyttää vain välttämättömiä evästeitä istunnon ylläpitämiseen ja anonyymiin tekniseen tilastointiin. Peda.net ei koskaan käytä evästeitä markkinointiin tai kerää yksilöityjä tilastoja. Lisää tietoa evästeistä